人乳头瘤病毒16型（HPV-16）是一种性传播感染病毒，目前有研究认为该HPV型别的感染与美国口咽部鳞状细胞癌的发病率增加有关。另有学者对每日吸烟量和口腔HPV感染之间的相关性进行研究。
美国约翰霍普金斯大学医学院Fakhry博士等对此展开研究，旨在探索口腔HPV-16感染率与反映所有当前烟草暴露因素（环境二手烟、吸烟、使用无烟烟草等）的目标生化标志物之间关系。结果发现，烟草使用或与口腔HPV-16感染有关。该研究在线发表在2014年10月8日的JAMA杂志上。
美国的全国健康和营养状况调查（NHANES）是一项对人口进行横断面、分层、多阶段的概率抽样调查，通过美国国家卫生统计中心机构审查委员会批准，并书面获取参与者的知情同意。
2009-2012年期间，调查反馈率为73.4％。流动体检中心年龄满14岁-69岁的参与者有资格接受口腔HPV DNA检测。使用30秒时长漱口的方式收集口腔脱落细胞，并按照以前文献报道的方法检测HPV-16感染。
采用计算机辅助自助调查技术，确定研究对象自我报告的烟草使用和性行为情况。其中，既往5天内自我报告的烟草使用情况包括任何含有尼古丁成分的烟草产品；近期体内烟草生化标志物包括血清可替宁（尼古丁在人体内进行初级代谢后的主要产物），以及尿液中的4-(甲基亚硝胺)-1-(3-吡啶基)-1-丁醇（NNAL，一种烟草特有致癌物质）。
共有20293人参与该调查研究，统计分析时将受访者年龄限定在18至59岁后（共计8527人），其中具有口腔HPV-16感染和近期烟草使用情况数据者6887人。主要观察指标为HPV-16的感染情况。使用NHANES样本权重对感染率进行估测，Wald检验对比不同生化标志物的数值。
为便于建模，对可替宁和NNAL进行对数转换，将其视作连续变量和分类变量。采用Logistic回归分析研究烟草使用与口腔HPV-16感染之间关联性。多因素模型中所纳入的所有变量，为双变量分析中统计学有意义（双侧P<0.05）的指标，以及依据文献报道总结出的重要因素。使用SUDAAN软件11.0.1版（RTI国际）对数据进行统计分析。
结果显示，受访的6887人中，有2012人（28.6％）为当前烟草使用者、63人（1.0％）检测发现具有口腔HPV-16感染。当前烟草使用者与非使用者相比，更可能为年轻人、男性、受教育程度较低并有较多数量的终身口交性伴侣。
在双变量分析中，有关烟草暴露的自我报告行为情况及口交性行为，与口腔HPV-16感染呈显著相关性。口腔HPV-16感染率在当前烟草使用者人群中更高（2.0％），相比之下，从未使用或既往有烟草使用史者则较低（0.6％）（P = 0.004）。
生化标志物方面，与无口腔HPV-16感染者相比，感染者体内可替宁（157.7ng/mL vs 57.2 ng/mL）和NNAL（0.36ng/mL vs 0.12 ng/mL）平均水平更高（P = 0.002）。
校正其他因素后，所有烟草暴露有关的生化标志物与口腔HPV-16感染的相关性依旧存在。研究观察到可替宁水平（P = 0.02的趋势）或NNAL（P = 0.01的趋势）水平与口腔HPV-16感染几率之间存在显著的剂量-反应关系。
可替宁每呈对数水平增加（每天约3支烟），与口腔HPV-16感染率呈独立相关性（调整后比值比1.31）；NNAL每呈对数水平增加（每天约4支烟），与口腔HPV-16感染率呈独立相关性（调整后比值比1.68）。
研究人员通过这项大型的基于人口的横断面研究，证实了当前烟草的使用行为及体内目标生化标志物与口腔HPV-16感染之间，具有显著的剂量-反应关系。
目前研究认为，烟草使用是宫颈癌发生发展中的一个协同因素，而HPV感染又是宫颈癌的一个重要病因。使用烟草对机体局部和全身发挥免疫抑制作用；然而，现在仍不清楚导致该研究结果的特定生物学机制。据推测，烟草使用情况可能改变了口腔HPV-16流行情况的一些决定因素，如感染率、感染持续时间或再感染等。
该研究发现强调了在口腔HPV-16感染自然病史和进展为恶性肿瘤的过程中，评估烟草使用情况的必要性。虽然对性行为因素进行了校正，但研究人员还不能完全排除烟草使用情况是风险行为的一个标志。
该研究的局限性在于一些不稳定估计值和横断面的研究设计，这些方面限制了研究者明确时间性或因果关系的能力。
